سائنسدانوں نے اس کا مطالعہ کرنے کے لئے ڈی این اے کو کیسے الگ کر دیا ہے؟

جواب:

ایسا کرنے کے لئے کچھ قدم ہیں، براہ کرم میرے برا انگریزی کو نظر انداز کریں، مجھے امید ہے کہ آپ اب بھی عمل کو سمجھ سکتے ہیں.

وضاحت:

ایسا لگتا ہے جیسے آپ سوچ سکتے ہو.

آتے ہیں کہ ہم ایک بچھ تھمس سے باہر ڈی این اے کو الگ کرنا چاہتے ہیں، آپ کو ان ہدایات پر عمل کرنے کی ضرورت ہے (وہ ایک سیب کے لئے جیسے ہی جہاں تک میں جانتا ہوں، لیکن اس میں چھوٹی تبدیلییں موجود ہیں):

1. 3 گرام کے 3 ٹکڑے ٹکڑے لے لو اور چھوٹے چھوٹے ٹکڑے ٹکڑے میں کاٹ دو، جیسے ہی کم از کم.

2. فی میل 75 ملی لیلین سلڈ - سوڈیم سینٹریٹ (ایس ایس سی) کے ساتھ یہ ایک بلینڈر میں رکھو اور اس بات کو یقینی بنائیں کہ بلینڈر بلیڈ مکمل طور پر ایس ایس سی میں احاطہ کرتا ہے، لہذا اگر آپ کو ضرورت ہے تو تھمس کا ایک ٹکڑا شامل کریں.

   ایس ایس سی اس بات کا یقین کرتا ہے کہ سیل جھلیوں کو تحلیل کیا جا رہا ہے.

   جب تک کہ ہر چیز ہموار نہ ہو، اس کا مرکب رکھیں.

3. سینٹرکریٹج کے لئے ایک ٹیوب میں رکھو اور اسے ایک اور ٹیوب کے ساتھ لوٹ لو تاکہ سینٹرکٹراج توڑ نہ سکے

4. ٹیوب میں سینٹرکریٹج میں 5000 منٹ پر 20 منٹ کے لئے رکھیں

5. جب آپ سینٹرکریٹج سے ٹیوبیں نکالتے ہیں تو آپ کو دو اجزاء کا خیال رکھنا چاہئے. سب سے نیچے ایک ٹھوس مادہ ہے، اسے گولی کہا جاتا ہے اور اس کے ساتھ ڈی این اے کے ساتھ سیل نگلی رکھتا ہے. آپ مائع مادہ بھی دیکھ لیں گے، جس کو سرنیٹینٹ کہا جاتا ہے اور اس میں تحلیل سیل جھلیوں کے ساتھ ایس ایس او پر مشتمل ہوتا ہے.

6. ایک سیال تحریک میں سرطنیت کو پھینک دیں، اس کو فیصلہ کیا جاتا ہے اور یہ آپ کو گولی کے ساتھ چھوڑ دیتا ہے.

7. گولی کے ساتھ ٹیوب میں 2.2 ایم NaCl کی ایک چھوٹی سی رقم رکھو، تاکہ گولی صرف نکلر میں شامل ہو. NaCl ایسے پروٹینوں کا سبب بنتا ہے جو ڈی این اے سے نمٹنے کے لئے گردش کرتی ہے.

8. اسے خالی ٹیس ٹیوب یا ہلکا پھلکا چھڑی سے ہلائیں. آخر میں آپ کو دو اجزاء ملنا چاہئے. سب سے اوپر اس پر پروٹین اور ایک viscous سیال.

9. ایک پائپیٹ کے ساتھ viscous سیال لے لو اور اس بات کو یقینی بنانا کہ آپ کو پروٹین کے بغیر viscous fluid نہیں ہے. (پروٹین کے بہت چھوٹے ٹکڑے ٹکڑے سے بچنے کے لئے بہت مشکل ہیں، لیکن ممکنہ طور پر بہت سے پروٹین سے بچنے کے لئے کوشش کریں)

10. بیکیک سیال ڈال دیں جس نے آپ بیکر میں پائپیٹڈ کیا اور اسے 2x اتنا اتنول شامل کریں. لیکن آہستہ ایتھنول شامل کریں کیونکہ آپ ڈی این اے کے ساتھ اس کا مرکب نہیں کرنا چاہتے ہیں. ایتھنول اور viscous سیال کے درمیان انٹرفیس میں آپ کو ڈی این اے کے بلبل آنے آنا چاہئے.

11. آہستہ آہستہ ایک گلاس چھڑی سے ہلچل، ڈی این اے منفی طور پر چارج کیا جاتا ہے لہذا اسے چھڑی پر رکھنا چاہئے.

12. اسے ایک ٹیسٹ ٹیوب میں رکھو اور ایس ایس سی کے ساتھ اسے پھیلاؤ.

پھر ایک خاص مشین آپ کو بتا سکتا ہے کہ آپ کو الگ الگ ڈی این اے کتنا الگ کیا گیا ہے اور یہ خالص ہے.