کیوں مغربی ایپٹ میں GAPDH استعمال کیا جاتا ہے؟ + مثال

کیوں مغربی ایپٹ میں GAPDH استعمال کیا جاتا ہے؟ + مثال
Anonim

جواب:

GAPDH اکثر لوڈنگ کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے.

وضاحت:

مغربی بلوٹوتنگ میں ہم اکثر GAPDH کو لوڈنگ کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہیں. اس کا کیا مطلب یہ ہے کہ GAPDH کے لئے تحقیق کی طرف سے ہم چیک کر سکتے ہیں کہ ہمارے پاس ایک قطار کے مختلف قطاروں پر پروٹین کی ایک برابر مقدار ہے.

استعمال کا ایک مثال - یہ کہتے ہیں کہ ہم ایک بیماری ہے جو ہم سوچتے ہیں کہ سیل میں ایک مخصوص پروٹین کی بلندی کا سبب بنتا ہے. ہم "صحت مند" خلیات اور "بیمار" خلیات کی ایک اور نمونہ سے نمونہ بنائیں گے. ہم پھر مغربی نمونے کے لئے ایک جیل پر دونوں نمونے کے برابر پروٹین کی مقدار کو لوڈ کریں گے.

دلچسپی کے ہمارے پروٹین کے لئے بلٹ کی آزمائش کے بعد ہم اس بیماری کے خلیات میں تلاش کرتے ہیں جو پروٹین کی سطح واقعی بلند ہوتی ہے (یہ ایک گہری بینڈ ہے جسے پھٹ پر پیدا ہوتا ہے). ثابت کرنے کے لئے کہ پروٹین میں یہ اضافہ سیل میں اظہار کی تبدیلی کی وجہ سے ہے، اس کے بجائے لوڈنگ آرٹرایکٹ (اس کے بجائے، خلیات میں پروٹین اظہار میں تبدیلی کی وجہ سے زیادہ تناسب بینڈ کی وجہ سے ہوتا ہے، اور ہماری طرف سے ناگزیر طور پر زیادہ نہیں لگ رہا ہے. "صحت مند" کے مقابلے میں "بیماری" کے نمونہ میں سے، ہم GAPDH کے لئے دھات کی تحقیقات کریں گے تاکہ یہ پتہ چلیں کہ کل پروٹین کی سطح دونوں کی صفوں میں ہے.

لہذا، ایسا کرنے سے ہم یہ ظاہر کر رہے ہیں کہ دو پرووں میں مسابقتی پروٹین کو بھرا ہوا ہے اور بینڈ کی شدت میں تبدیلی جسے ہم دیکھ رہے ہیں وہ دلچسپی کے پروٹین کے لئے پروٹین اظہار میں تبدیلیوں کی وجہ سے ہیں.