کرومیٹرافی آئن ایکسچینج کیا ہے؟ + مثال

جواب:

یہ ایک پروسیسنگ ہے جس میں مختلف پروٹین کو ان کے چارج اور پابند خصوصیات کے مطابق الگ کرنے کے لئے ایک عمل ہے.

وضاحت:

مختلف پی ایچ او مختلف پروٹینز مختلف الزامات لگاتے ہیں. ایک سیٹ پی ایچ ایچ میں پروٹین کا مرکب رکھ کر آپ کو ایک مرکب ہوسکتا ہے جس میں پروٹین مختلف چارج خصوصیات ہیں.

اگر اس پروٹین کا یہ مرکب ایک کالم پر ڈالا جاتا ہے جس پر اس پر چارج ہوتا ہے تو اس کا کالم مخالف پروٹین کے اندر پروٹین باندھے گا.

پھر آپ مختلف حلوں کا استعمال کرسکتے ہیں جو آئنوں کے مختلف مقدار پر مشتمل ہوتے ہیں تاکہ کالم سے پروٹین کو الگ کردیں.

مثال کے طور پر، کہتے ہیں کہ آپ کو پروٹین کا مرکب تھا جس سے آپ کو ایک خاص پروٹین کو پاک کرنا ہے. اگر آپ جانتے تھے کہ کسی خاص پی ایچ او میں دلچسپی کا پروٹین مثبت طور پر چارج کیا گیا ہے تو آپ اس مرکب کو ایک کالم پر ڈال سکتے ہیں جن میں منفی طور پر الزام لگایا گیا مواد موجود ہے.

تمام پروٹین جو چارج نہیں لیتے تھے، یا جب منفی طور پر الزام لگایا جاتا ہے وہ کالم کے ذریعہ براہ راست بہاؤ گا. پھر آپ اپنے مثبت چارجز کو کالم کے سیلاب سے مثبت آئنوں کے ذریعے جاری کر سکتے ہیں جو کالم پر منفی چارج مکمل کرے گا. اس مقابلہ میں آپ کے پروٹین کو مستحکم بنانا ہوگا.

یہ ہو رہا ہے اس کا ایک مثال ہے.

ہر ٹرے ایک مختلف حراست میں ایک بفر پر مشتمل ہے اور 175 ملی میٹر نمونہ (اوپر بائیں بازو کونے) میں بہت کم سرخ / بھوری پروٹین کو چارج جھلی پر پابندی لگایا جاسکتا ہے کیونکہ بفر میں آئنوں کے درمیان مقابلہ ہوتا ہے. جھلی پر چارج پابند کردہ سائٹس کے لئے پروٹین (بفر میں آئنوں نے "جیت لیا" ہے کیونکہ اس میں سے زیادہ ہیں اور اس نے پروٹین کو پابند کرنے سے روک دیا ہے). نچلے حصے میں نمونہ میں بہت پروٹین جھلی پر پابند ہے کیونکہ بائنڈنگ سائٹس کے لئے مقابلہ کرنے کے لئے کم آئنوں موجود ہیں.

اس ویڈیو میں آپ آپریشن میں ایونین ایکسچینج کرومیٹریگرافی دیکھ سکتے ہیں: