مغرب بلوٹ کیوں ایلسا کی تصدیق کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے؟ + مثال

جواب:

عام طور پر یہ ایک اینٹی بیڈی کی مخصوصیت کی جانچ ہے.

وضاحت:

ایک ELISA میں یہ بہت مشکل ہے کہ یہ بتانا مشکل ہے کہ آپ کے انبوبی دلچسپیوں کے پروٹین، ایک مکمل طور پر مختلف پروٹین، یا ایک پروٹین کی ایک قسم کے پابند ہے.

مغربی بلوٹ انٹیبیو کی مخصوصیت کو چیک کرنے کے لئے استعمال کیا جائے گا (آپ کو یہ یاد رکھنا چاہیے کہ مغرب بلوٹ ممکنہ غلط پروٹین کے ساتھ تمام کراس ردعمل کا پتہ لگانا نہیں کرسکتے).

مغربی دھماکے میں، آپ پروٹین کا سائز دیکھ سکتے ہیں جس میں اینٹی بائیو پابند ہے (آپ ایلیا میں نہیں رہ سکتے ہیں). لہذا، مثال کے طور پر، اگر آپ اینٹی بوڈی 56 کیڈیڈا کے پروٹین پر پابند رہیں اور آپ کو بینڈ پر ~ 56 کی کی ڈی اے میں ایک بینڈ نظر آئے تو آپ مناسب طور پر یقین کر سکتے ہیں کہ اینٹی بائیو صحیح پروٹین پر پابند ہے.

اگر، دوسری جانب، آپ نے 32 کلوگرام پر ایک بینڈ دیکھا تو آپ یہ نتیجہ لے سکتے ہیں کہ اینٹی بائیو غلط پروٹین پر پابند ہے. اسی طرح، اگر بہت سے بینڈ مغربی بلوٹ پر نظر آتے ہیں تو یہ تجویز کرے گا کہ (پروٹین کی کھپت کی غیر موجودگی میں) انٹیبڈی مختلف قسم کے مختلف پروٹینوں پر پابند تھا.

جیل پر 32 کیڈیڈا بینڈ کی مثال کے طور پر، اور ایک سے زیادہ بینڈ بھی ظاہر ہوتا ہے، یہ یہ بتائے گا کہ اینٹی بائیو ELISA کے لئے مخصوصیت کی کمی نہیں ہے اور یہ کہ ELISA میں کسی بھی نتائج کی وجہ سے نتائج دلچسپی کے پروٹین کے لئے مخصوص نہ ہوں.

اگر میں اس طرح کے امتحان کو چلاتا ہوں تو میں انٹیبیو کو آزمانے کے لئے کچھ قسم کی "مداخلت" میں شامل ہوسکتا ہوں. مثال کے طور پر، اگر میں نے اپنے اینٹی باڈی کو پیپٹائڈ کو اٹھایا ہے تو میں صحیح اینٹی بائیو حل میں پیسائڈ کو درست پابند کرنے کے لۓ ٹیسٹ کر سکتا ہوں. یہی ہے، پیپٹائڈ کی موجودگی میں مجھے کوئی بینڈ نہیں دیکھنا چاہئے یا ایلیزا کے نتیجے میں، جیسا کہ میرا بنیادی اینٹی بائپو پیپٹائڈ سے زیادہ کی موجودگی کی وجہ سے پابند نہیں رہ سکے گا.